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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分析
更新時(shí)間:2021-12-03   點(diǎn)擊次數(shù):1529次

上海通蔚生物同坐長(zhǎng)期的ELISA試劑盒方面的實(shí)驗(yàn),累積了很多成功經(jīng)驗(yàn),現(xiàn)對(duì)外分享,給大家參考下:讓你的實(shí)驗(yàn)無(wú)后顧之憂。


1、要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%。可用水和天平">電子天平進(jìn)行校正。校正方法自己放狗吧,但有專(zhuān)業(yè)人員進(jìn)行矯正。


2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支(靠,基本是廢話了)。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)(應(yīng)該是特別是!)。


3、要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定(這個(gè)是容易忽視的!)。


4、實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。


5、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。


6、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。


7、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去(應(yīng)該是加樣的時(shí)候,板上稀釋不算的吧)。

ELISA實(shí)驗(yàn)

8、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能(注意是平行晃動(dòng),即上下or左右)。


9、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)(老辦法是放入濕盒內(nèi),紗布加點(diǎn)無(wú)菌水即可)。


10、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干(報(bào)紙就免了吧!)。


11、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存(洗液先用現(xiàn)配不費(fèi)多少事的)。


12、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配(同前,避光!)。


13、檢測(cè)前,要打開(kāi)酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。


14、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸(終止液為硫酸,小心毀容)。


15、待檢樣品要澄清,否則會(huì)影響結(jié)果。


16、溫浴時(shí)間應(yīng)遵守試劑盒規(guī)定。


17、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性。


18、對(duì)結(jié)果有疑問(wèn)的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。


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